5 准备
采集待检的标本。
6 方法
6.1 1.直接涂片染色法
(1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。戴消毒手套后,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用接种环或棉拭子蘸取脓液,轻轻涂于载玻片上。
(3)当日配制的姬姆萨溶液染色1h。
(5)油镜下阳性标本中可在上皮细胞内找到1~3个或更多呈蓝色、深蓝色或暗紫色的包涵体。
6.2 2.衣原体抗原检测法
(1)取材。
①男性患者从尿道取材时,可用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,轻轻转动后取出分泌物(应略带黏膜)。
②女性患者取材时,先用阴道窥器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宫颈口内1~2cm,转动并停留10~20s取出。
(2)用商品试剂盒检测,检测前先将试剂盒和测试卡等室温下复温30min。
(3)加试剂至塑料管刻度处(约0.6ml),将拭子标本浸入管内摇匀,置80℃水浴,10~20min取出,转动拭子并沿管壁挤压,弃去拭子,提取液置室温冷却后盖上管盖。
(4)将测试卡置台面,加入5滴提取液于检体窗,静置30min后观察结果。
(5)质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性,结果窗无变化为阴性。
6.3 3.免疫荧光法
(1)将标本涂于玻片凹孔中或圆圈中,自然干燥,丙酮或无水甲醛固定5min,漂洗,再干燥。
(2)加30μl荧光素标记的沙眼衣原衣原体单克隆抗体试剂覆盖凹孔,玻片置湿盒中或37℃下作用15min,去掉多余试剂,用蒸馏水淋洗涂片,自然干燥,加一滴封固液,盖上盖玻片,置荧光显微镜下检查。
(3)阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的衣原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光,在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构,也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。