4 血清补体C4裂解产物的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 取材
4.4 血清补体C4裂解产物的测定原理
抗原在含有一定量的单一抗体琼脂中进行电泳,在电场力的作用下,两者比例合适时形成沉淀峰类似火箭而得名。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比,与抗体浓度成反比,因此可以作为抗原定量试验。
4.5 试剂
(1)0.025mol/L pH8.6巴比妥缓冲液 称巴比妥钠10.3g,巴比妥1.84g,加入蒸馏水500ml,加热助溶,待冷,加蒸馏水至1000ml,即成0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液。再取0.05mol/L巴比妥缓冲液1份,加等量的蒸馏水即成0.025mol/LpH8.6巴比妥缓冲液。
4.6 操作方法
(1)制备抗体琼脂糖板 取已融化的10.0g/L琼脂糖凝胶与适当浓度的抗C4血清混合,浇板(8cm×8.5cm),待冷却凝固后打孔。
(2)在距一边1cm处打孔8个,孔径为3mm,孔间距5mm,挑去孔内琼脂糖。
(3)各孔内分别加入1∶4稀释的待检血清和不同浓度的C4参考血清10μl。以三层滤纸为桥,置0.025mol/L pH8.6巴比妥缓冲液的电泳槽内进行电泳,将有孔的一端连接阴极,端电压3~4V/cm,电泳4~5h后,关闭电源,取下琼脂板测量。
4.7 正常值
4.8 化验结果临床意义
C4含量升高见于风湿热的急性期、多发性骨髓瘤(比正常值大8倍)、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的关节炎等;
降低常见于自身免疫性慢活肝、SLE、多发性硬化、类风湿性关节炎、肾病、亚急性硬化性全脑炎等。在SLE,C4的降低常早于其他补体成分,且较其他成分回升迟。狼疮性肾炎较非狼疮性肾炎C4值显著低下。
各型乙型肝炎下降程度:慢性活动性肝炎>急性肝炎、慢性迁延性肝炎等传染病。
4.9 附注
(1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。
(3)C4不很稳定,在4℃贮存2周或-20℃ 60天均可使C4值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。