3 吸附白喉疫苗药典标准
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 汉语拼音
Xifu Baihou Yimiao
3.1.3 英文名
Diphtheria Vaccine, Adsorbed
3.2 定义、组成及用途
本品系用白喉杆菌,在适宜的培养基中培养产生的毒素经甲醛脱毒、精制,加入氢氧化铝佐剂制成。用于6个月~12岁的儿童预防白喉。
3.3 1 基本要求
生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
3.4 2 制造
3.4.1 2.1 菌种
生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
3.4.1.1 2.1.1 名称及来源
采用白喉杆菌PW8株(CMCC 38007)或由PW8株筛选的产毒高、免疫力强的菌种,或其他经批准的菌种。
3.4.1.2 2.1.2 种子批的建立
3.4.1.3 2.1.3 种子批的传代
主种子批自启开后传代不超过5代,工作种子批启开后至疫苗生产,传代应不超过10代。
3.4.1.4 2.1.4 种子批的检定
3.4.1.4.1 2.1.4.1 培养特性
在吕氏琼脂培养基上生长的菌落应呈灰白色、圆形突起、表面光滑、边缘整齐。在亚碲酸钾琼脂培养基上生长的菌落应呈灰黑色、具金属光泽。在血琼脂培养基上生长的菌落呈灰白色、不透明、不产生α溶血素。
3.4.1.4.2 2.1.4.2 染色镜检
应为革兰氏染色阳性,具异染颗粒;菌体呈一端或两端膨大、杆状,菌体排列呈栅栏状X形或Y形。
3.4.1.4.3 2.1.4.3 生化反应
发酵葡萄糖、麦芽糖、半乳糖,均产酸不产气;不发酵蔗糖、甘露醇、乳糖(2010年版药典三部附录XIV)。
3.4.1.4.4 2.1.4.4 特异性中和试验
3.4.1.4.5 2.1.5 种子批的保存
3.4.2 2.2 类毒素原液
3.4.2.1 2.2.1 毒素
3.4.2.1.1 2.2.1.1 生产用种子
工作种子批检定合格后方可用于生产。由工作种子批传代于适宜的培养基,然后传代至产毒培养基种子管2~3代,再传至产毒培养基培养制成生产用种子。
3.4.2.1.2 2.2.1.2 生产用培养基
3.4.2.1.3 2.2.1.3 产毒
采用培养罐液体培养,培养过程中应严格控制杂菌污染,凡经镜检或纯菌试验发现污染者应废弃。
3.4.2.1.4 2.2.1.4 收获
检测培养物滤液或离心上清液,毒素效价不低于150Lf/ml时收获。
3.4.2.2 2.2.2 精制
3.4.2.2.1 2.2.2.1
3.4.2.2.2 2.2.2.2
3.4.2.2.3 2.2.2.3
用同一菌种、培养基处方、精制方法制造的类毒素在同一容器内混合后除菌过滤者为一批。
3.4.2.3 2.2.3 脱毒
3.4.2.3.1 2.2.3.1
毒素或精制毒素中加入适量的甲醛溶液,置适宜温度进行脱毒。精制毒素亦可加适量赖氨酸后再加甲醛溶液脱毒。
3.4.2.3.2 2.2.3.2
脱毒到期的类毒素或精制类毒素应每瓶取样做絮状单位(Lf)测定。
3.4.2.3.3 2.2.3.3 脱毒检查
每瓶类毒素或精制类毒素取样,用灭菌生理氯化钠溶液分别稀释至100Lf/ml,用体重2.0kg左右的家兔2只,每只家兔分别皮内注射上述稀释样品各0.1ml及25倍稀释的锡克试验毒素0.1ml,另注射0.1ml灭菌生理氯化钠溶液作为阴性对照,于96小时判定结果。样品注射部位须无反应或仅有极微反应,锡克毒素反应须为阳性,阴性对照应无反应。
3.4.2.3.4 2.2.3.4
脱毒不完全者可继续脱毒,必要时可补加适量甲醛溶液。
3.4.2.3.5 2.2.3.5
精制类毒素可加0.1g/L硫柳汞为防腐剂,毒素精制法制造的精制类毒素未除游离甲醛者可免加防腐剂。
3.4.2.4 2.2.4 类毒素原液检定
按3.1项进行。
3.4.2.5 2.2.5 保存及有效期
于2~8℃避光保存。自脱毒试验合格之日起,原液有效期为42个月,总有效期为72个月。
3.4.3 2.3 半成品
3.4.3.1 2.3.1 佐剂配制
3.4.3.1.1 2.3.1.1
配制氢氧化铝可用三氯化铝加氨水法或三氯化铝加氢氧化钠法,用氨水配制时需透析除氨后使用。
3.4.3.1.2 2.3.1.2
配制成的氢氧化铝原液应为浅蓝色或乳白色的胶体悬液,不应含有凝块或异物。
3.4.3.1.3 2.3.1.3
3.4.3.2 2.3.2 吸附类毒素的配制
3.4.3.2.1 2.3.2.1
含白喉类毒素30~50Lf/ml。
3.4.3.2.2 2.3.2.2
氢氧化铝含量应不高于3.0mg/ml。
3.4.3.2.3 2.3.2.3
3.4.3.2.4 2.3.2.4
加入氯化钠至8.5g/L。
3.4.3.3 2.3.3 半成品检定
按3.2项进行。
3.4.4 2.4 成品
3.4.4.1 2.4.1 分批
3.4.4.2 2.4.2 分装
3.4.4.3 2.4.3 规格
每瓶0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml。每1次人用剂量0.5ml,含白喉类毒素效价应不低于30IU。
3.4.4.4 2.4.4 包装
3.5 3 检定
3.5.1 3.1 类毒素原液检定
3.5.1.1 3.1.1 pH值
应为6.4~7.4(2010年版药典三部附录Ⅴ A)。
3.5.1.2 3.1.2 絮状单位(Lf)测定
依法检查(2010年版药典三部附录Ⅺ D),应符合规定。
3.5.1.3 3.1.3 纯度
每1mg蛋白氮应不低于1500Lf。
3.5.1.4 3.1.4 无菌检查
依法检查(2010年版药典三部附录Ⅻ A),应符合规定。
3.5.1.5 3.1.5 特异性毒性检查
每瓶原液取样,等量混合,用生理氯化钠溶液稀释成50Lf/ml,用体重250~350g豚鼠4只,每只腹侧皮下注射5ml,观察30天。前5天注意观察注射局部,第10天、第20天、第30天称体重。观察期间每只动物体重不得持续下降,到期每只动物体重应比注射前增加,注射局部无坏死,无连片脱皮、无脱毛,后期不得有麻痹症状。
3.5.1.6 3.1.6 毒性逆转试验
每瓶原液取样,用PBS(pH7.0~7.4)分别稀释至30~50Lf/ml,置37℃42天,用体重2.0kg左右的家兔2只,于每只家兔背部分别皮内注射上述稀释原液各0.1ml及25倍稀释的锡克试验毒素0.1ml,另注射0.1ml PBS作为阴性对照,于72小时判定结果。原液注射部位红肿反应直径应不高于15mm,锡克毒素反应须为阳性,阴性对照应无反应。
3.5.2 3.2 半成品检定无菌检查
依法检查(2010年版药典三部附录Ⅻ A),应符合规定。
3.5.3 3.3 成品检定
3.5.3.1 3.3.1 鉴别试验
可选择下列一种方法进行:
(2)疫苗加枸橼酸钠或碳酸钠将佐剂溶解后,做絮状试验(2010年版药典三部附录Ⅺ D),应出现絮状反应;
(3)疫苗经解聚液溶解佐剂后取上清液,做凝胶免疫沉淀试验(2010年版药典三部附录Ⅷ C),应出现免疫沉淀反应。
3.5.3.2 3.3.2 物理检查
3.5.3.2.1 3.3.2.1 外观
振摇后为乳白色均匀悬液,无摇不散的凝块或异物。
3.5.3.2.2 3.3.2.2 装量
依法检查(2010年版药典三部附录Ⅰ A),应不低于标示量。
3.5.3.3 3.3.3 化学检定
3.5.3.3.1 3.3.3.1 pH值
应为6.0~7.0(2010年版药典三部附录Ⅴ A)。
3.5.3.3.2 3.3.3.2 氢氧化铝含量
应不高于3.0mg/ml(2010年版药典三部附录Ⅶ F)。
3.5.3.3.3 3.3.3.3 氯化钠含量
应为7.5~9.5g/L(2010年版药典三部附录Ⅶ G)。
3.5.3.3.4 3.3.3.4 硫柳汞含量
应不高于0.1g/L(2010年版药典三部附录Ⅶ B)。
3.5.3.3.5 3.3.3.5 游离甲醛含量
应不高于0.2g/L(2010年版药典三部附录Ⅵ L)。
3.5.3.4 3.3.4 效价测定
每1次人用剂量中白喉类毒素效价应不低于30IU(2010年版药典三部附录Ⅺ C)。
3.5.3.5 3.3.5 无菌检查
依法检查(2010年版药典三部附录Ⅻ A),应符合规定。
3.5.3.6 3.3.6 特异性毒性检查
每亚批取样等量混合,用体重250~350g豚鼠4只,每只腹侧皮下注射2.5ml,观察30天,注射部位可有浸润,经5~10天变成硬结,30天可吸收不完全。在第10天、第20天、第30天称体重,到期每只豚鼠体重比注射前增加,无晚期麻痹症者为合格。
3.6 4 保存、运输及有效期
3.7 5 使用说明
【药品名称】
通用名称:吸附白喉疫苗
英文名称:Diphtheria Vaccine,Adsorbed
汉语拼音:Xifu Baihou Yimiao
【成分和性状】
本品系用白喉杆菌,在适宜的培养基中产生的毒素经甲醛脱毒、精制,加入氢氧化铝佐剂制成。为乳白色均匀混悬液,长时间放置后佐剂下沉,溶液上层无色澄明,但经振摇后能均匀分散,含防腐剂。
【接种对象】
6个月~12岁儿童。
【作用与用途】
接种本疫苗后。可使机体产生体液免疫应答。用于6个月~12岁的儿童预防白喉。
【规格】
每瓶0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml。每1次入用剂量0.5ml,含白喉类毒素效价应不低于30IU。
(1)上臂三角肌肌内注射。
(2)剂量如下:
【不良反应】
常见不良反应:
(1)可出现轻度发热反应,一般不需处理;中度发热,应对症处理。
(2)注射部位可出现红肿、疼痛、发痒。
罕见不良反应:
(2)局部硬结,1~2个月即可吸收。
(3)过敏性皮疹:一般在接种疫苗后72小时内出现荨麻疹,应及时就诊,给予抗过敏治疗。
极罕见不良反应:
(1)过敏性休克:一般在注射疫苗后1小时内发生。应及时抢救,注射肾上腺素进行治疗。
(2)过敏性紫癜:出现过敏性紫癜反应时应及时就诊,应用皮质固醇类药物给予抗过敏治疗,治疗不当或不及时有可能并发紫癜性肾炎。
【禁忌】
(1)已知对该疫苗的任何成分过敏者。
(2)患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者。
【注意事项】
(1)以下情况者慎用:家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者。
(2)使用对应充分摇匀,如出现摇不散的凝块、异物、疫苗瓶有裂纹或标签不清者,均不得使用。
(3)疫苗开启后应立即使用,如需放置,应置2~8℃,并干1小时内用完,剩余均应废弃。
(4)注射后局部可能有硬结,1~2个月即可吸收,注射第2针时应换另侧部位。
(5)应备有肾上腺素等药物,以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场观察至少30分钟。
(6)严禁冻结。
【贮藏】
于2~8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】
36个月。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
企业名称:
生产地址:
邮政编码:
电话号码:
传真号码:
网 址:
3.8 版本
《中华人民共和国药典》2010年版