4 体内血小板活化标志物的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 取材
4.4 体内血小板活化标志物的测定原理
β-血栓球蛋白(β-TG),血小板4因子(PF-4):PF-4及β-TG是血小板特异性蛋白,包含在血小板α-粒中,血小板活化时被释放出来,并用酶免或放免法可测得血浆中的含量。
活化血小板免疫细胞学测定法:血小板活化后导致多种活化的肿瘤依赖抗原表达。P-选择素(CD62p)在血小板分泌时从α-粒细胞膜移至血小板外膜。其他肿瘤抗原如CD64被激活的GPⅡb/Ⅲa复合物,腺体诱导结合位点(LIBS),受体诱导结合位点(RIBS)标记。肿瘤抗原免疫标记后,基于特殊的免疫荧光及被特殊化的如血小板标记物的阳性百分比,活化的血小板可用免疫细胞学法识别出来。
4.5 试剂
β-TG和PF-4:血液抗凝需使用特殊的混合剂。混合剂可外购,每个试验室也可自行生产。包括血小板抑制物如前列腺素E1和腺苷。乏血小板血浆是在严格的冰冻条件下通过离心法从抗凝血中提取出来的。
4.6 操作方法
酶免式放射免疫法式。
4.7 正常值
β-TG ~35μg/L
PF-4 ~15μg/L
p-选择素表达(CD62p) ≤4%
CD63表达 ≤4%
4.8 化验结果临床意义
血浆中β-TG和PF-4升高可见于以下情况:人工心脏瓣膜、冠心病、急性心肌梗死、糖尿病、外周静脉闭塞及肺动脉栓塞。在其他急性脑梗死或其他动脉血栓疾病中血浆中升高达正常人6~10倍。这一浓度代表正常血小板浓度下1%血小板中β-TG、PF-4的含量。提示本方法或许反应因采集技术不良或血样处理不当时的血小板活性。例如仅1/1000血小板释放其颗粒成分,可导致血浆中β-TG和PF-4水平上升2倍。
循环中活化的血小板免疫细胞学测量提示特别在心血管及血栓形成疾病中的上升情况。有一不肯定研究显示循环中活化的血小板数量是冠状动脉球囊扩张术(PTCA)后早期再灌注的预后因素。
4.9 附注
检测到体内活化血小板的一个关键问题是防止血液收集过程中及收集后的人为血小板活化。通过采用标准血样混合剂、遵守适当的血液收集规则可减少测量β-TG、PF-4方法中人为的血小板活化。进一步讲,β-TG、PF-4经肾脏代谢,因此两者血浆浓度依赖肾功能。目前没有一个公认的样本指南用以检测循环中活化的血小板。然而样本采集后被直接与甲醛混合的稳定作用将符合以下规则:
(2)无抗原破坏。