3 概述
人、动物、植物、微生物间存在一种嗜异性抗原(Forssman antigen,F.antigen),可激发机体产生与种属特异性无关的嗜异性抗体(嗜异性凝集素)(Forssman antibody,F.antibody),除与相应抗原起反应外,还能与其他动物的红细胞或组织浸液等发生反应。检测患者血清中F-antibody,可协助临床诊断治疗某些疾病。
7 嗜异性凝集吸收试验的原理
某些物质激发机体所产生的抗体,除与相应抗原起反应外,还能与人或其他动物的红细胞或组织浸液等发生反应,它与种属特异性无关,故统称为嗜异性抗体或嗜异性凝集素。
传染性单核细胞增多症患者,某些正常人或曾用抗血清(马血清)治疗的患者,其血清中有类似的嗜异性抗体,均能与绵羊红细胞凝集,但可通过吸附试验加以鉴别。
8 试剂
(1)绵羊红细胞悬液:将脱纤维蛋白绵羊红细胞放4℃24h后用生理盐水洗3次,按比容配成1%细胞悬液。
(3)20%豚鼠肾脏组织悬液:取豚鼠肾脏挤去血液,用生理盐水洗净血液。切碎并研磨成糊状,每2g加生理盐水10ml。隔水煮沸1h,补足失水量,加石炭酸至最终浓度为0.5%防腐。冰箱保存能使用数月。
(4)20%牛红细胞悬液:将脱纤维蛋白牛血用生理盐水洗3次,按比容配成20%细胞悬液。隔水煮沸1h,补足失水量,加入石炭酸至最终浓度为0.5%防腐。4℃保存。
9 操作方法
(1)初步嗜异性凝集试验:
①排列10支试管,第1管加生理盐水0.8ml,其余各管0.5ml。
②第1管加受检血清0.2ml,混匀后吸0.5ml加第2管内,混匀,依次稀释至第9管,第10管作为对照。
③每管各加1%绵羊红细胞悬液0.5ml,此时1~9管血清稀释倍数依次为1∶10,l∶20,1∶40,1∶80,1∶160,1∶320,1∶640,1∶1280,1∶2560。
④混匀、37℃水浴1h,如未出现凝集,应移置4℃过夜,再放37℃水浴1h,作最后观察。
⑤结果判定同一般试管血凝试验,血清最高稀释管出现(++)凝集者,该管血清稀释倍数的倒数即为该血清的效价。
(2)鉴别嗜异性凝集试验:
①豚鼠肾脏组织吸收试验取20%豚鼠肾脏组织悬液1ml,加受检血清0.2ml,混匀。室温放lh,其间常振摇;以1500r/min离心,取上清液,即为1∶5稀释的吸收过血清;取该血清按初步嗜异性凝集试验复测抗体效价。结果判断同前。
②牛红细胞吸收试验取20%牛红细胞悬液1ml,加受检血清0.2ml,混匀,室温放1h,其间常振摇。以1500r/min离心;10min,上清液即为1∶5稀释的吸收过的血清。取该血清按初步嗜异性凝集试验复测抗体效价。结果判断同前所述。
11 化验结果临床意义
(l)传染性单核细胞增多症患者血清中嗜异性抗体,可被牛红细胞完全吸收,而被豚鼠肾脏组织部分吸收。
(2)注射抗血清(马血清)或患有血清病者血清中的嗜异性抗体可被豚鼠肾脏组织和牛红细胞完全吸收。
(3)传染性单核细胞增多症患者的嗜异性抗体并不经常为阳性,最早出现于起病第4天,大多数为第1周后出现,常持续至发病后第3周,少数患者可维持数月。有报道患病第1周呈有意义的抗体效价的病例约为40%,至第2周上升至60%。但由于嗜异性抗体出现的时间颇不一致,因此须定期多次复查,如在病程中抗体效价上升,则更有意义。