4 尿TH蛋白的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 化验取材
4.4 尿TH蛋白的测定原理
未标记的THP和一定量的125I-THP与有限量的抗-THP抗体进行竞争性免疫反应,即抗体与125I-THP结合的量受未标记THP所抑制,若未标记THP量少,则抗体与125I-THP结合量就多,反之抗体与125I-THP结合量就少。反应平衡后,分离结合部分(B)与游离部分(F),测定结合部分的放射性计数(cpm),计算各标准样品的结合百分率B/B0,以标准浓度为横坐标,B/B0为纵坐标,做标准曲线,根据待测标本的B/B0,即可从曲线上查出标本中的THP含量。
4.5 试剂
(1)缓冲液:2瓶(液体)
每瓶用40ml蒸馏水稀释。
(2)THP标准:6瓶(冻干品)
每瓶准确地加2.0ml稀释后的缓冲液溶解,浓度分别是31.25、62.5、125、250、500、1000ng/ml。
(3)125I-THP:1瓶(冻干品)
(4)抗THP血清:1瓶(冻干品)
(5)固相二抗:2瓶(液体)
用前摇匀,严禁冰冻。
4.6 操作方法
取圆底聚苯乙烯试管若干(注意不要用平底试管,以免沉淀不集中),编号后按表1加样。
任取三管测总放射性计数(cpm)均值为T。
3500r/min离心分离15min,弃上清,测沉淀放射性计数(cpm)。
4.7 正常值
(36.86±7.08)mg/24h尿(酶联免疫吸附测定法)。
4.8 化验结果临床意义
4.9 附注
(1)灵敏度:10ng/ml
(2)测定范围:31.25~1000ng/ml
(3)有效期:测定盒内全部试剂溶解前4℃贮存,有效期为1个月。
注意:固相二抗严禁冰冻。
(4)抗血清的特异性:与β2-MG交叉反应1%;与Alb交叉反应0.2%。