4 尿N-乙酰β-D氨基葡萄糖苷酶的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 化验取材
4.4 尿N-乙酰β-D氨基葡萄糖苷酶的测定原理
对硝基苯-N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷在N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)作用下释放出游离的对硝基苯酚,后者在405nm处有强吸收峰,测定对硝基苯酚生成量,即可计算NAG活性。
4.5 试剂
(1)50mmol/L枸橼酸盐缓冲液(pH 4.6):称枸橼酸(C6H8O7·H2O)5.4g,枸橼酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)10g,用蒸馏水溶解后稀释至1000ml。
(2)10mmol/L底物缓冲液:称对硝基苯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷342.3mg,用上述缓冲液稀释至100ml,混匀,4℃冰箱可保存10天。
(3)50mmol/L硼砂-氢氧化钠缓冲液(pH 9.8):称硼砂(Na2B4O7·H2O)4.77g,用蒸馏水溶解,加0.2mmol/L NaOH 170ml,再用蒸馏水稀释至1000ml。
(4)3mmol/L对硝基酚标准液:取纯化的对硝基酚41.7mg,用蒸馏水溶解并稀释至100ml,混匀后置冰箱保存。
4.6 操作方法
按表1操作。
混合,在405nm波长,1cm光径,蒸馏水调零,读取各管吸光度,用(Au-Ac)之差查标准曲线。
4.7 正常值
5~30u/L。(比色法)
4.8 化验结果临床意义
升高:见于肾小管疾病、肾病综合征、休克引起的肾功能衰竭、流行性出血热、中毒性肾病、肝硬化晚期等。
4.9 附注
妊娠中、晚期的妇女,也可有尿N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶升高。