3 概述
钩端螺旋体病是由各种致病性螺旋体引起的人畜共患的自然疫源性疾病。致病性钩端螺旋体的群和血清型众多,其群特异性的化学组成为类脂多糖复合物,型特异性的化学组成为蛋白多糖复合物,不同型钩端螺旋体的多糖组成有所差异,患者体内可产生相应抗体,检查特异性抗体有助于本病的诊断。
5 检查名称
8 试剂
(1)荧光素标记抗人IgG。
(2)钩端螺旋体抗原。可用4~5个血清型的钩端螺旋体培养物等量混合。
(3)钩端螺旋体抗原片制备。将钩端螺旋体抗原用接种环取少量,涂于薄而清洁的载玻片上,每张玻片涂2排16点,自然干燥后,在室温中用丙酮固定5min备用。
9 操作方法
(1)用磷酸盐缓冲盐水(pH值7.2)将经56℃灭活30min的受检血清倍比稀释成1∶50~1∶400,共4个稀释度。
(2)将各稀释度的受检血清分别滴加在抗原涂片的各点上,每张涂片可滴4份受检血清。放湿盒内37℃作用30min。
(3)倾去玻片上残留的血清。用磷酸盐缓冲盐水(pH值7.2)洗涤。
(4)加数滴荧光素标记的抗人IgG抗体,放37℃ 30min。
(5)同法洗涤,待干。加缓冲甘油(pH值9.5)封固,用荧光显微镜检查。
(6)结果判断:
(3+)菌体稍膨胀,呈明亮的淡绿色荧光。
(2+)菌体清晰,呈明亮的淡绿色荧光。
(-)看不到菌体。
10 正常值
阴性。