2 英文参考
Urine—Determination of chromium—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 37—1996《尿中铬的石墨炉原子吸收光谱测定方法》(Urine—Determination of chromium—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method)由中华人民共和国卫生部于1996年10月14日发布,自1997年05月01日起实施。
6 4 试剂
4.2 硝酸,ρ20=1.42 g/mL,优级纯,必要时重蒸馏。
4.3 铬标准溶液:准确称取2.8288 g的重铬酸钾(分析纯,预先在120℃干燥过的),用水(4.1)溶解,配成1 mgCr6+/mL的储备液。临用前,用水(4.1)稀释成1μgCr6+/mL的标准应用溶液。
4.4 质控样:用标准尿样、接触者混合尿样或加标的正常人混合尿样、加标的模拟尿作质控样。
8 6 分析步骤
8.1 6.1 仪器操作条件
波长 357.9 nm
干燥 17A 60s(阶梯)
狭缝 0.2 nm
灰化 100A 40 s(阶梯)
铬灯电流 20 mA
原子化 230A 4s(阶梯)
进样量 20μL
清洗 300A
氩气 1 L/min(原子化停气)
8.2 6.2 空白试验
用水代替尿样按9+1的比例加入硝酸(4.2)。
8.3 6.3 样品处理
将尿样(5)由冰箱中取出,放至室温,彻底振荡混匀。
8.4 6.4 标准曲线(标准加入法)
取4支试管(3.4),按下表配制标准管。
铬标准管的制备
管 号 | 1 | 2 | 3 | 4 |
铬标准应用液(4.3),mL | 0 | 0.01 | 0.02 | 0.03 |
水(4.1),mL | 0.1 | 0.09 | 0.08 | 0.07 |
尿样(6.3),mL | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
铬含量,μg/L | 0 | 10 | 20 | 30 |
按仪器操作条件(6.1)测定各管和空白管(6.2)的吸光值。各管的吸光值减掉空白管的吸光值,以吸光值为纵坐标,铬含量为横坐标绘制标准曲线。
8.5 6.5 测定
6.5.1 标准曲线(6.4)外延使与横坐标相交,对应于原点与交点的距离,即为原尿样中铬的浓度。按式(1)、(2)换算成标准比重时的浓度。
6.5.2 大批样品分析时,可采用标准加入计算法定量。即分取两份样品,置于5 mL试管中,每份1 mL,一份加入一定量的铬标准溶液(加入铬产生的吸光值应接近原尿样吸光值的一半),另一份加入同体积水。按6.1条测定,同时做空白(6.2)。由两样品的吸光值减掉空白的吸光值,按式(1)、(3)计算出标准比重时尿铬的浓度。在测定前后以及每测定10个样品后,测定一次质控样。
9 7 计算
7.1 按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数(k)。
7.2 标准加入法按式(2)计算标准比重下尿中铬的浓度。
式中:X——尿中铬的浓度,μg/L;.
c——由标准曲线查得的铬的浓度,μg/L。
7.3 标准加入计算法按式(3)计算尿中铬的浓度。
式中:
c——样品加标后铬的浓度,μg/L。
10 8 说明
8.1 本法最低检测浓度为0.54 μg/L(空白值3倍标准差);标准曲线线性范围0~120 μg/L;精密度:CV=3.0%~5.8%(尿铬浓度9~90μg/L,n=6);加标回收率95.5%~103.6%(尿铬浓度7.2~32.2μg/L,加标量9~90μg/L,n=6)。
8.2 用硝酸酸化尿样可提高稳定性,改进基体,防止氯化铬(沸点低)挥发损失。市售的硝酸常含相当量的铬,使用前应按样品测定条件检查,必要时蒸馏后再用。
8.3 最好采晨尿测定,若采班前或班后尿时,工人要脱离生产现场,换下工作服,洗净手,然后再排尿,以防止外来污染.
8.4 本法的特点是样品不经前处理,直接进样分析,不使用任何背景校正器,依靠仔细地选择样品灰化电流(温度)消除尿基体的干扰。测定基体复杂的尿样时,也可配合氘灯背景校正器扣除可能残余的背景吸收。方法适用于早期进口仪器和国产仪器。由于仪器型号不同,性能各异,本方法提供的仪器操作条件仅供参考。
使用带有先进的背景校正器(塞曼效应,卤钨灯等)和多功能程序石墨炉的仪器分析时,可参考美国农业部Beltsuille人类营养研究中心Calude Veillon等推荐的方法,该法经四个实验室用不同型号的仪器验证,被认为是可靠的。该法仪器操作条件如下:原子吸收分光光度计(P-E 5000/500体系);铬灯电流25 mA;狭缝小于0.7 nm;干燥,100℃斜坡15 s,保持20 s,130℃斜坡10s,保持20 s;灰化,1200℃斜坡15 s,保持60 s;原子化:2700℃,4s(内部气体Ar 50 mL/min);干燥、灰化阶段内部气体Ar300 mL/min,背景校正器:卤钨灯,进样25μL;热解石墨管。使用其他型号仪器时,可根据仪器的操作手册和自己的实验设定仪器操作条件。
8.5 尿铬的挥发温度略高于基体的挥发温度,因此在选择挥发温度时,应控制到基体基本除掉,而铬无明显损失的程度。
8.6 石墨管易老化,使测试的灵敏度逐渐降低,因此,标准曲线必须与样品分析同时制备,并使用同一支石墨管。
8.7 Fe3+、Cu2+、Mn2+、V5+、Mo6+、Ti4+0.05μg/L,Ni2+150μg/L不干扰测定。
8.8 质控样如使用标准尿样或加标的模拟尿时,可考察准确度和精密度。如使用接触者尿或加标的正常尿时,可考察精密度。但人尿不宜久存。模拟尿只含人尿的大量成分。