2 英文参考
Blood—Determination of lead—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 20—1996《血中铅的石墨炉原子吸收光谱测定方法》(Blood—Determination of lead—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method)由中华人民共和国卫生部于1996年10月14日发布,自1997年05月01日起实施。
6 4 试剂
本标准所用试剂除另有说明外,均为分析纯试剂。
4.2 硝酸,优级纯ρ20=1.42 g/mL。
4.7 Triton X-100溶液.0.1%(v/v)。
4.8 铅标准溶液
4.8.1 铅标准储备液:购买国家级铅标准储备液(1 mL=1 mg铅)或称取0.100 g金属铅,溶于1.0 mL硝酸(4.2),加水稀释到100 mL,此溶液1 mL=1 mg铅。或称取0.1598 g硝酸铅(105℃干燥2h)用1 mol/L硝酸溶解并稀释至100 mL,此溶液1 mL=1 mg铅。存于聚乙烯塑料瓶中。
4.8.2 铅标准应用液:临用前用硝酸溶液(4.5)逐级稀释成1 mL=0.4μg铅的中间液,然后用Triton X-100溶液稀释成1 mL=0.11g铅(应用液Ⅰ)和1 mL=0.2 μg铅(应用液Ⅱ)的标准应用液。
4.9 质控样:用标准血样、接触者混合血样或加标的正常人混合血样作质控样。
7 5 采样、运输和保存
可选用下述两种方式:
5.1 常规采集耳垂或手指血(严格控制污染和组织液稀释,去掉第一滴):
用微量取液器(3.7)抽取血样40μL,置于盛有0.32 mL Triton X-100溶液(4.7)的带盖离心管中,充分振摇,然后加入40μL硝酸溶液(4.4),混匀。冰瓶运输,4℃下至少可保存5d。
5.2 早晨空腹采集静脉血,置入事先加好肝素钠溶液(4.6,用量为每毫升血20~40μL)的管中混匀。冰瓶运输,于4℃下可保存三周。
8 6 分析步骤
8.1 6.1 仪器操作条件
参照下列仪器操作条件,将原子吸收分光光度计调整到最佳测定状态。
波长 283.3 nm
干燥 70~110℃ 70 s
狭缝 1.3 nm
灰化 400~500℃ 30 s 保持10 s
灯电流 7.5 mA
原子化 2400℃ 7s
载气Ar 150 mL/min
清洗 2500℃ 3s
背景校正
8.2 6.2 空白试验
取0.36 mLTriton X-100溶液(4.7),加入0.04 mL硝酸溶液(4.4),混匀,与样品同时进行测定。
8.3 6.3 标准曲线的绘制
6.3.1 取7个带盖离心管,按下表配制标准管。
血铅标准管的配制
管 号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
铅标准应用液(Ⅰ),mL | 0 | 0.02 | 0.04 | 0.08 | 0.16 | 0.32 | 0 |
铅标准应用液(Ⅱ),mL | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.20 |
Triton X-100,mL | 0.32 | 0.30 | 0.28 | 0.24 | 0.16 | 0 | 0.12 |
正常人血.mL | 0.04 | 0.04 | 0.04 | 0.04 | 0.04 | 0.04 | 0.04 |
铅含量,μg/L | 0 | 5 | 10 | 20 | 40 | 80 | 100 |
6.3.2 各管加0.04 mL硝酸溶液(4.4),混匀。按6.1条的条件测定吸光度值。
6.3.3 以1~6号管的吸光度值减去0号管的吸光度值为纵坐标,加入标准铅含量为横坐标,绘制标准曲线。
8.4 6.4 样品测定
6.4.1 将盛有稀释血样(5.1)的带盖离心管和试剂空白按6.1条的条件测定吸光度值。
6.4.2 或将抗凝的静脉血(5.2)由冰瓶中取出,放至室温,振摇均匀,取40μL,按5.1条稀释后,进样10μL,按6.1的条件测定吸光度值。
6.4.3 样品的吸光度值减去试剂空白的吸光度值,由标准曲线查得的浓度即为稀释血样中铅的浓度。6.4.4 在测定前后及每测10个样品后测定一次质控样。
10 8 说明
8.1 本法的最低检测浓度3μg/L;精密度CV =3.7%~5.0%(血铅浓度109~800μg/L,n=6);血样加标回收率95.1%~103.2%(加标浓度10~40 μg/L);血铅标准样测定符合率99.1%。
8.2 血样采集时间不限。采血时必须离开作业场所,局部采血前顺次用肥皂、稀硝酸擦洗,用酒精消毒。
8.3 在测定过程中,干燥、灰化温度和时间的选择很重要,要防止样品的飞溅。每只石墨管的阻值不同,更换石墨管后需重新作标准曲线。
8.4 共存物的干扰及去除,血中三倍于正常值的NaCl、K+、Ca2+、Mg2+和三倍治疗量的EDTA对测定无影响。用标准加入法分析可以消除基体的干扰。
8.5 如血样含铅量超出测定范围,可增加稀释倍数。